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  目的：臭氧是一種用于飲用水消毒的物理殺菌劑。本研究旨在探討臭氧化三蒸餾水聯(lián)合以埃索美拉唑?yàn)榛A(chǔ)的三聯(lián)療法是否能提高幽門螺桿菌(Hp)的根除率，促進(jìn)十二指腸潰瘍的愈合。

  方法：采用碳14(14C)尿素呼氣試驗(yàn)、快速尿素酶試驗(yàn)及病理檢查，共確診132例Hp感染陽性患者。隨后將患者分為4組，每組33例。第1、2組為慢性胃炎，第3、4組為十二指腸潰瘍。第1組和第3組患者采用標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法，包括阿莫西林1g每日兩次，克拉霉素0.5g每日兩次，埃索美拉唑20mg，每日一次，鋁碳酸鎂片1片，每日三次。第2組和第4組患者飲用臭氧化三蒸餾水聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法：每天300毫升臭氧三蒸餾水，阿莫西林1g每日兩次，克拉霉素0.5g每日兩次，埃索美拉唑20mg，每日一次，鋁碳酸鎂咀嚼片1片，每日三次?？笻p治療期為2周，隨后為埃索美拉唑和鋁碳酸鎂治療4周。第3、4組抗Hp治療4周后進(jìn)行胃鏡檢查，停藥4周后進(jìn)行14C尿素呼氣試驗(yàn)。

  結(jié)果：胃鏡檢查第3組十二指腸潰瘍21例處于愈合期，第4組29例處于愈合期，兩組比較有顯著性差異(P=0.022)。第1組26例14C尿素呼氣試驗(yàn)陰性，Hp消除率為79%。第2組Hp清除率為97%(n=32)，第3組Hp清除率為73%(n=24)，第4組Hp清除率為94%(n=31)?？ǚ綑z驗(yàn)顯示第1組和第2組之間以及第3組和第4組之間有顯著性差異(p<0.05)。與標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法相比，飲用臭氧三蒸餾水聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法根除Hp的效果顯著提高。

  結(jié)論：飲用臭氧化三蒸餾水配合標(biāo)準(zhǔn)治療，可顯著提高Hp根除率，促進(jìn)十二指腸潰瘍愈合。

  關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌;胃炎;十二指腸潰瘍;臭氧三蒸餾水

顯微鏡下的幽門螺旋桿菌

  幽門螺桿菌(Hp)是目前已知的唯 一胃內(nèi)細(xì)菌。Hp感染在慢性胃炎和消化性潰瘍的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，是胃癌、腺癌和胃粘膜相關(guān)淋巴組織(MALT)淋巴瘤的危險(xiǎn)因素。Hp被認(rèn)為是一種致癌微生物，是最早被證實(shí)對人類具有致癌作用的原核生物。抗Hp治療已成為Hp相關(guān)性慢性胃病的常規(guī)治療方法。然而，近年來，抗藥性已成為Hp根除失敗的關(guān)鍵因素。探索發(fā)現(xiàn)新的治療方案來治療Hp似乎是醫(yī)生和研究人員的首要任務(wù)。研究表明，臭氧以及氯，被廣泛應(yīng)用于飲用水處理中，主要用來殺滅大腸桿菌，并可能消除幽門螺桿菌。臭氧作為一種物理殺菌劑，與抗生素相比，在體內(nèi)表現(xiàn)出不同的功能。在本研究中，我們研究了飲用臭氧化三蒸餾水和以埃索美拉唑?yàn)榛A(chǔ)的標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)療法對幽門螺桿菌相關(guān)性慢性胃炎和十二指腸潰瘍患者的治療效果，并確定臭氧是否促進(jìn)十二指腸潰瘍病變的愈合。

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材料和方法

  病人招募

  招募共132名慢性胃病患者進(jìn)行研究。年齡21～65歲，男性72例，女性60例。所有受試者均為上海市公共衛(wèi)生臨床中心門診及住院患者，均因上腹痛、胃酸反流、便血、腹脹等癥狀就診。所有患者均簽署知情同意書。

  胃鏡檢查

  所有患者均經(jīng)胃鏡檢查確診。活動(dòng)期十二指腸潰瘍66例，慢性淺表性胃炎66例。

  患者Hp評價(jià)

  所有患者均經(jīng)14C尿素呼氣試驗(yàn)檢測Hp陽性。采用奧林巴斯胃腸鏡進(jìn)行胃粘膜活檢。進(jìn)一步檢查包括2個(gè)粘膜活檢，幽門周圍2-3厘米。通過快速尿素酶試驗(yàn)、組織病理學(xué)檢查和粘膜活檢Giemsa染色進(jìn)一步證實(shí)Hp感染;病理學(xué)研究排除了癌性潰瘍。治療前后4周取血進(jìn)行血清癌胚抗原檢測。

  臭氧三蒸餾飲用水的產(chǎn)生

  采用制備好的臭氧化三蒸餾水。三蒸餾水中的臭氧濃度為每300毫升5ppm。臭氧三蒸餾水中不含溴酸鹽。

  實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

  132例患者分為4組，每組33例。1、2組慢性胃炎33例，3、4組十二指腸潰瘍33例。所有其他因素隨機(jī)分組。

 抗Hp治療

  第1組和第3組患者采用標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法，包括阿莫西林1g每日兩次，克拉霉素0.5g每日兩次，埃索美拉唑20mg每日1次，鋁碳酸鎂咀嚼片1片，每日三次。第2組和第4組患者分別給予臭氧三蒸餾水和標(biāo)準(zhǔn)的埃索美拉唑三聯(lián)療法：300毫升臭氧三蒸餾水每日兩次，阿莫西林1g每日兩次，克拉霉素0.5g日兩次，埃索美拉唑20mg每日1次，鋁碳酸鎂咀嚼片1片，每日三次。

  14C尿素呼氣試驗(yàn)測定Hp根除率及胃鏡檢查十二指腸潰瘍愈合期

  抗Hp治療2周，埃索美拉唑和鋁碳酸鎂治療4周。抗Hp治療4周后，第3組和第4組患者進(jìn)行第二次胃鏡檢查，停藥4周后，對每名患者進(jìn)行第二次14C尿素呼氣試驗(yàn)檢測Hp。 

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結(jié)果

  實(shí)驗(yàn)入組標(biāo)準(zhǔn)

  14C尿素呼氣試驗(yàn)中超過100dpm診斷Hp感染?？焖倌蛩孛冈囼?yàn)，當(dāng)放在試驗(yàn)室中的活檢組織含有Hp時(shí)，試劑的黃色變?yōu)榧t色(圖1)，表明活檢胃粘膜中Hp呈陽性。病理檢查提示胃鏡下的患者活檢胃腺固有層中存在大量彎曲桿狀細(xì)菌Hp(圖2)。

圖1.尿素酶快速檢測試劑盒。

 當(dāng)活檢樣品放置在試驗(yàn)箱中幾分鐘后，黃色表示Hp陰性，當(dāng)陽性時(shí)，其圓形黃色變?yōu)榧t色。

圖2：病理檢查證實(shí)胃鏡活檢的胃粘膜中有大量幽門螺桿菌。吉姆薩染色×400

  十二指腸潰瘍的二次胃鏡檢查

  胃鏡檢查顯示，第3組十二指腸潰瘍愈合期21例，第4組十二指腸潰瘍愈合期29例，治愈率分別為63.63%和87.88%。兩組比較有顯著性差異(P=0.022)。

表1：飲用臭氧化三蒸餾水對十二指腸潰瘍愈合的影響。

注：3組：4組，P=0.022

圖3：飲用臭氧化三蒸餾水聯(lián)合埃索美拉唑三聯(lián)療法治療前后十二指腸潰瘍

  圖3A顯示了第一次內(nèi)鏡檢查時(shí)的十二指腸潰瘍;圖3B顯示了抗幽門螺桿菌4周后進(jìn)行第二次內(nèi)鏡檢查時(shí)的潰瘍愈合階段，該檢查包括飲用臭氧三蒸餾水和標(biāo)準(zhǔn)埃索美拉唑三重療法。

  第二次14C尿素呼氣試驗(yàn)

  埃索美拉唑停藥4周后，4個(gè)不同治療組14C尿素呼氣試驗(yàn)結(jié)果明顯不同(表1)。第1組26例14C尿素呼氣試驗(yàn)陰性，Hp消除率為79%。第2組Hp清除率為97%(n=32)，第3組Hp清除率為73%(n=24)，第4組Hp清除率為94%(n=31)?？ǚ綑z驗(yàn)顯示1、2組與3、4組間有顯著性差異(p<0.05)。

  結(jié)果表明，在慢性胃炎患者和十二指腸潰瘍患者中，飲用臭氧三蒸餾水聯(lián)合埃索美拉唑三聯(lián)療法根除幽門螺桿菌的效果均優(yōu)于埃索美拉唑三聯(lián)療法。治療期間未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。治療前后癌胚抗原水平穩(wěn)定在0-5μg/ml之間。

表2: 治療前后14C尿素呼氣試驗(yàn)。治療前后

注：1組：2組，P=0.02；3組：4組，P=0.02

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討論

  質(zhì)子泵抑制劑聯(lián)合抗生素治療Hp感染已成為慢性胃炎和消化性潰瘍的常規(guī)治療方法。根除Hp對改善功能性消化不良上腹部疼痛和燒灼感癥狀也有良好效果。通常，標(biāo)準(zhǔn)的三聯(lián)療法是由兩種抗生素和質(zhì)子泵抑制劑作為一線治療。Hp的最 佳治療方法應(yīng)該保證根除率在90%以上。然而，成功根除Hp的療法涉及許多決定因素，如個(gè)體原發(fā)性或繼發(fā)性抗生素耐藥性、粘膜藥物濃度、患者依從性、副作用和成本。目前世界上大多數(shù)地區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)療法根除Hp率不到80%。研究表明，以阿莫西林、克拉霉素、埃索美拉唑?yàn)橹鞯娜?lián)療法治療慢性胃炎和幽門螺桿菌感染的十二指腸潰瘍患者的根除率分別為79%和73%。Hp對抗生素的耐藥性降低了慢性胃病和消化性潰瘍的臨床治療效果。此前的一項(xiàng)隨機(jī)對照試驗(yàn)表明，臭氧納米氣泡水具有新型抗菌劑的潛力。Fontes等人證明，通過低劑量臭氧的霧化單次局部應(yīng)用完全抑制了對抗菌劑具有耐藥性的所有潛在致病菌株的生長。在體外，臭氧對多種耐藥菌和導(dǎo)致牙周病代的細(xì)菌具有較強(qiáng)的殺菌作用。因此，臭氧在醫(yī)學(xué)上可以作為初級治療的輔助物。我們的研究表明，飲用臭氧化三蒸餾水有助于根除慢性胃炎和十二指腸潰瘍患者胃粘膜中的幽門螺桿菌感染。這些發(fā)現(xiàn)表明，臭氧不僅可以用來消除水中的微生物，還可以治療胃幽門螺桿菌感染。與傳統(tǒng)藥物治療相比，臭氧治療能加快胃粘膜修復(fù)，促進(jìn)Hp根除，縮短胃潰瘍恢復(fù)時(shí)間，減少復(fù)發(fā)機(jī)會，這與臭氧促進(jìn)十二指腸潰瘍損傷愈合的研究結(jié)果一致。包括靜脈使用臭氧的生理治療(自血療法)，這些方法已被證明在改善臨床癥狀、組織再生過程和根除幽門螺桿菌這三方面是有效的;然而，聯(lián)合方案是最 佳的方案。我們的研究表明，在傳統(tǒng)的抗生素加質(zhì)子泵抑制劑治療的基礎(chǔ)上加入臭氧三蒸餾水，可以進(jìn)一步提高Hp的根除率。這些結(jié)果表明，臭氧能提高傳統(tǒng)抗生素加質(zhì)子泵抑制劑治療Hp的根除率，在今后Hp治療中發(fā)揮更重要的作用。隨著抗藥性細(xì)菌的增多，臭氧獨(dú)特的物理抗菌特性可能使處理變得更有價(jià)值和時(shí)間效率。

  然而，臭氧對消除Hp的作用還沒有詳細(xì)的報(bào)道，其機(jī)理尚不清楚。臭氧是一種強(qiáng)大的氧化劑。在工業(yè)中，它被廣泛用作水、空氣凈化和設(shè)備清洗的抗菌劑，例如易腐物品的消毒、醫(yī)療器械的消毒以及清潔或表面處理工藝。臭氧是一種不穩(wěn)定的氣體;一旦產(chǎn)生，氣態(tài)臭氧迅速分解為氧分子(O2)和有活性的氧原子(O)。這種氣體無色，氣味刺鼻，呈液體或固體形式可發(fā)生爆炸。在20°C時(shí)半衰期為40分鐘，在0°C時(shí)約為140分鐘，因此患者需要在十至二十 分鐘內(nèi)飲用現(xiàn)制備的臭氧水。臭氧消除微生物的生物和化學(xué)機(jī)制包括三種。首先，臭氧可能直接與細(xì)菌和病毒發(fā)生反應(yīng)，破壞它們的細(xì)胞器、DNA和RNA。第二，臭氧可能穿透細(xì)胞膜，并與外膜上的脂蛋白和脂多糖發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致通透性突變，最終導(dǎo)致細(xì)胞溶解。Bialoszewski博士等證明臭氧水是一種有效的生物膜殺菌劑，作用時(shí)間只需30秒;臭氧-氧的混合氣體的殺菌活性會降低，其中，將生物膜暴露于氣態(tài)消毒劑的時(shí)間相對延長。在體外，臭氧水對細(xì)菌生物膜的破壞比臭氧-氧混合物更為有效。第三，臭氧可刺激Hp患者局部或全身細(xì)胞或體液免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)白細(xì)胞介素、白三烯和前列腺素釋放，從而減輕炎癥，促進(jìn)傷口愈合。

  在整個(gè)研究過程中，沒有發(fā)現(xiàn)任何副作用。Kawara博士和他的研究小組還證明，臭氧納米氣泡水(NBW3)在胃幽門螺桿菌治療中維持其在很寬的pH范圍內(nèi)的消毒活性，并且對哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織沒有表現(xiàn)出細(xì)胞毒性;它們暗示胃蛋白酶以劑量依賴的方式抑制NBW3活性。臭氧作為一種無污染的水消毒劑，由于其不穩(wěn)定，臭氧分解成氧分子和單個(gè)氧原子，氧原子再迅速相互結(jié)合，臭氧三蒸餾水中的臭氧不會留下有毒殘留物。溶解在三蒸餾水中的臭氧一旦通過胃和腸就被釋放出來，并通過胃粘膜消除幽門螺桿菌。在醫(yī)療用途中，由醫(yī)用氧產(chǎn)生的臭氧以精確的治療劑量給藥，禁止吸入使用，并主張臭氧在齲齒中具有極好的健康益處，降低血液膽固醇和刺激抗氧化反應(yīng)，改善靜息肌肉的氧合，用于缺氧和缺血綜合征的補(bǔ)充治療。我們的研究表明，臭氧具有根除幽門螺桿菌的潛力，特別是當(dāng)與標(biāo)準(zhǔn)治療相結(jié)合時(shí)，可以提高幽門螺桿菌的根除率。此外，臭氧化三蒸餾水具有生產(chǎn)簡單、安全、方便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。因此，應(yīng)進(jìn)一步的研究和發(fā)現(xiàn)，以確定消除Hp的臭氧三蒸餾水的最 佳和安全濃度。臭氧可能成為一種更廣泛應(yīng)用的治療方法，以對抗細(xì)菌感染。